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技術(shù)文章

大豆油中脂肪酸的氣相色譜分析法

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氣相色譜法測定大豆油中脂肪酸成分  

  一、目的與要求

  油脂是食品加工中重要的原料和輔料,也是食品的重要組分和營養(yǎng)成分。必需脂肪酸是維持人體生理活動的必要條件,人體所必需的脂肪酸一般取自食品用油,即食用油脂。氣相色譜法測定油脂脂肪酸組分是現(xiàn)在zui常用的方法,也是一些相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)(如:GB/T17377)規(guī)定應(yīng)用的檢測方法。

  甲酯化是分析動植物油脂脂肪酸成分的常用的前處理方法,也是常用的標(biāo)準(zhǔn)方法(GB/T 17376-1998)。

  本實(shí)驗(yàn)要求了解氣相色譜法測食用油脂肪酸組成的原理,掌握樣品的前處理方法,學(xué)習(xí)食用油脂中脂肪酸組分的色譜分析技術(shù)。

  二、原理

  本實(shí)驗(yàn)甲酯化方法采用國標(biāo)--GB/T 17376-1998,甘油酯皂化后,釋出的脂肪酸在3氟化硼存在下進(jìn)行酯化,萃取得到脂肪酸甲酯用于氣象色譜分析。

  樣品中的脂肪酸(甘油酯)經(jīng)過適當(dāng)?shù)那疤幚恚柞セ┖?,進(jìn)樣,樣品在汽化室被汽化,在一定的溫度下,汽化的樣品隨載氣通過色譜柱,由于樣品中組分與固定相間相互用的強(qiáng)弱不同而被逐一分離,分離后的組分,到達(dá)檢測器(detceter)時經(jīng)檢測口的相應(yīng)處理(如FID的火焰離子化),產(chǎn)生可檢測的信號。根據(jù)色譜峰的保留時間定性,歸一法確定不同脂肪酸的百分含量。

  三、儀器與試劑

 ?。ㄒ唬﹥x器-

  1.氣相色譜儀:,配氫火焰離子化檢測器(FID)。

  2.恒溫水浴鍋

  3.移液管

  4.膠頭滴管

  5.小圓底燒瓶

  6.冷凝管

  7. 樣品瓶

  (二)試劑:.石油醚、已醚、氫氧化鉀、甲醇均為AR級。

  四、實(shí)驗(yàn)步驟

 ?。ㄒ唬悠奉A(yù)處理

  酯化測定:

  取0.2g油樣于10ml容量瓶中,家5.0ml   4:3石油醚-已醚,使其溶解,在加4.0ml  0.5mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液,振搖1分鐘,放置8min后加水1.0ml,靜止20min使之分層,取上層液注入色譜儀,保留時間定性,面積歸一化法定量。

  測定:

 ?。?)氣相色譜條件

 ?、偕V柱:石英彈性毛細(xì)管柱,0.32mm(內(nèi)徑)×30m,內(nèi)膜厚度0.5um。

 ?、诔绦蛏郎兀?150℃保持3min,5℃/min升溫至220℃,保持10min;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度300℃。

  ③氣體流速:氮?dú)猓?0mL/min,氫氣:40mL/min,空氣:450mL/min,分流比30﹕1。

  ④柱前壓:25kpa

 ?。?)色譜分析

  自動進(jìn)樣,吸取0.4-1μL試樣液注入氣相色譜儀,記錄色譜峰的保留時間和峰高。利用標(biāo)準(zhǔn)圖譜確定每個色譜峰的性質(zhì)(定性),利用軟件自帶的自動積分方法計(jì)算各脂肪酸組分的百分含量。

  五、鑒別

  1.測定常見植物油主要脂肪酸的構(gòu)成比并查閱有關(guān)資料,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,不同的植物油主要脂肪酸的組成大部分有相同之處,但是主要脂肪酸的含量是不相同的。根據(jù)脂肪酸組成與含量,即可鑒別油品種類。

  2.氣相色譜法測定脂肪酸,通常用硫酸-甲醇法,和AOAC-IUPAC 標(biāo)準(zhǔn)法,我們采用了氫氧化鉀-甲醇法,經(jīng)試驗(yàn)3種方法測定結(jié)果差異無顯著性。

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